Practica 8. Confirmación del grupo sanguíneo A, B y D combinado con la determinación de Ac irregulares

OBJETIVO

  • El objetivo de esta práctica es confirmar el grupo sanguíneo A, B y D combinado con la determinación de Ac irregulares. Esta tarjeta se utiliza para la confirmación del grupo sanguíneo ABO y RhD del receptor y para verificar la presencia de anticuerpos irregulares con la prueba de antiglobulina indirecta (PAI) (LISS/Coombs) por medio de 3 hematíes reactivo (ID-DiaCell I-II-III).

FUNDAMENTOS

  • Las tarjetas permiten analizar un alto número de muestras con trazabilidad total cuando se emplean sistemas automatizados. Se almacenan a temperatura ambiente y facilitan la realización de pruebas directas e indirectas para el análisis de compatibilidad sanguínea. 
  • La tarjeta ABO/Rh para paciente es un soporte plástico de alta transparencia que contiene 6 microtubos con sus cámaras de incubación. Cada microtubo contiene microesferas de Dextrano hidratado en una formulación que incluye anticuerpos monoclonales en un medio tamponado y azida de sodio como preservante (< 0,1%). Además, se ha incorporado colorantes para una fácil identificación visual asociada a los reactivos anti-A (erioglaucina) y anti-B (tartrazina). El sello de aluminio permite garantizar la hermeticidad y evitar pérdida de volumen por evaporación durante el período de uso del producto. Cada tarjeta permite una determinación ABO/Rh, incluida la prueba inversa. 
  • El reactivo anti-D consiste en una mezcla que aglutinará la mayoría de las variantes del antígeno D (D débiles y D parciales) pero no aglutinará la variante DVI.
    Para asegurar la trazabilidad, en caso de emplear equipamiento automático en el procesamiento de muestras, las tarjetas tienen un código de barras el cual contiene el número de lote, fecha de expiración y un número correlativo.

UTILIDAD CLÍNICA

  • Los tipos de sangre están determinados por los tipos de antígenos en las células de la sangre, unas proteínas en la superficie de las células sanguíneas que pueden causar una respuesta del sistema inmunológico.
    • Además, Landsteiner descubrió que, en la superficie de los hematíes, existían dos tipos de proteínas marcadoras o antígenos, que denominó A y B. Observó, además, que el plasma contiene también dos tipos de anticuerpos que reaccionan con las proteínas de los glóbulos rojos y que llamó anticuerpos 'Anti-A' y 'Anti-B.' De esta manera estableció cuatro tipos de grupos sanguíneos: Grupo A, Grupo B, Grupo AB, y Grupo 0.
    • A su vez, para determinar el grupo sanguíneo de una persona hay que tener en cuenta el factor Rh, un tipo de proteína en la superficie de los glóbulos rojos. La mayoría de las personas que tienen el factor Rh son Rh positivo. Los que no tienen el factor Rh son Rh negativo.
    • Como todo en esta vida, el conocer cuál es nuestro grupo sanguíneo no es fundamental. Sí debemos conocerlo si estamos embarazadas, o bien si vamos a recibir una trasfusión de sangre. No obstante, para nuestro día a día no es imprescindible.

MATERIALES

Micropipeta
Puntas micropipeta

REACTIVOS

MUESTRA

EQUIPOS

PROCEDIMIENTO

  1.  Preparamos la suspensión de hematíes al 5%.
    1. 0,5 ml de diluyente.
    2. 50 microlitros de sangre total.
  2. Identificamos la tarjeta ID-Card con el nombre del grupo.
  3. Retiramos la lámina de sellado de los microtubos que vayamos a utilizar.
  4. Pipeteamos 12 microlitros de la suspensión de hematíes dle paciente en los primeros 3 microtubos.
  5. Pipeteamos 50 microlitros de cada ID-DiaCell en los microtubos 4, 5 y 6.
  6. Agregamos 25 microlitros de plasma del paciente en los microtubos 4, 5 y 6.
  7. Incubamos la tarjeta ID-Card durante 15 minutos a 37ºC.
  8. Centrifugamos la tarjeta durante 10 minutos.
  9. Leemos y anotamos resultados.

RESULTADOS

  • Obtenemos como resultado que el paciente es B+. No podemos obtener los demás resultados correctamente, ya que por falta de muestras para realizar la práctica, utilizamos plasma de otra persona, y los resultados obtenidos no son correctos.

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