Práctica 16. Porcentaje de reticulocitos (RET) 21/02/2020

OBJETIVO

El objetivo de esta práctica es determinar el RET por un número determinado de hematíes.

Calcular el número de reticulocitos existentes por volumen de sangre.
Valorar el RET, el número absoluto de reticulocitos y de la actividad eritropoyética.

Los reticulocitos son eritrocitos inmaduros presentes en sangre periférica, lugar donde terminan su maduración a hematíes. Contienen restos de ARN y ribosomas que precipitan en presencia de los coloranes vitales como el azul de metileno o el azul de cresil brillante.
En los reticulocitos incubados con el colorante se ven imágenes gránulo-filamentosas identificables con el microscopio óptico, que corresponden a los restos de ARN.
El recuento de reticulocitos puede realizarse mediante método manual o por citometría de flujo. En el caso que nos ocupa realizaremos el recuento manual. Y para ello utilizaremos el colorante azul de cresil brillante.
Los valores normales de reticulocitos se sitúan entre el 0.5% y el 2% del total de hematíes presentes en la sangre. La cifra obtenida permite catalogar una anemia como regenerativa o arregenerativa. Se trata de un parámetro útil para comprobar la respuesta del organismo al tratamiento de algunas anemias.

Si un niño tiene una cantidad reducida de glóbulos rojos, que se denomina anemia, es posible que se haga un recuento de reticulocitos. El recuento de reticulocitos ayuda a los médicos a saber si la médula ósea está funcionando correctamente en la producción de glóbulos rojos.

Tubos en gradilla

Micropipeta

Puntas micropipeta

Colocamos en un tubo pequeño 3 gotas de solución de colorante.
Añadimos 3 gotas de muestra sanguínea.
Tapamos el tubo con parafilm.
Mezclamos agitando el tubo suavemente para que los eritrocitos absorban bien el colorante.
Dejamos en reposo a temperatura ambiente unos 20 minutos.
Volvemos a homogeneizar y realizamos una extensión sobre un portaobjetos.
Observamos con el microscopio.