Práctica 15. Hemoglobina 17/02/2020

OBJETIVO

• El objetivo de esta práctica es realizar una determinación cuantitativa de hemoglobina en sangre.

FUNDAMENTO

• La hemoglobina es oxidada por la acción del ferricianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hemoglobina presenta en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

• La hemoglobina es una proteína que se encuentra en la sangre, le otorga el color rojo y es la encargada de transportar oxígeno por la sangre.
• Un nivel bajo de hemoglobina puede indicar: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias.
• Un nivel alto de hemoglobina puede indicar cardiopatías, deshidratación o estancia en lugares de gran altitud.

MATERIALES

• Pipeta graduada y auxiliar de pipeteado.
• Micropipeta y puntas de pipeta.
• Agua destilada.
• Bote para desechos.
• Gradilla.
• Soporte para cubetas.
• Cubetas de espectrofotometría (vol 1 cm).
• Tubos de ensayo. 

REACTIVOS

MUESTRA

Muestra de sangre venosa

APARATOS Y EQUIPOS

PROCEDIMIENTO

1. En primer lugar, ajustamos el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
2. Pipeteamos:
   
3.  
4. Mezclamos e incubamos 3 minutos a temperatura ambiente.
5. Leemos la absorbancia del calibrador y la muestra frente al blanco de reactivo.

 RESULTADOS Y OBSERVACIONES

• La absorbancia del patrón: 0,368 A.
• La absorbancia de la muestra: 0,358 A
• El resultado se encuentra dentro dle rango de valores normales (12-16 g/dL).